Descarte de Hemoglobinuria Paroxística Nocturna (HPN)
1 a 10 casos por un millón de persona
Aunque esta podría estar subestimada ya que muchos casos no son diagnosticados
Fuente: Borowitz 2010
Años es la edad mediana de presentación
De los cuales 600 necesitan un trasplante de médula ósea
Fuente: Schrezenmeier 2014
De las muertes cuya causa se conoce
Necesita un donante no familiar compatible para su trasplante
Fuente: MINSA
¿Por qué es importante la
Citometría de Flujo?
La HPN se origina a partir de una mutación en las células madre que afecta la síntesis de la proteína de anclaje Glicofosfatidilinositol (GPI), indispensable para ciertas proteínas como CD59 y CD55, inhibidoras fisiológicas del complemento.
Como consecuencia de este defecto, los eritrocitos son más sensibles a la lisis por complemento, produciéndose hemólisis y activación plaquetaria.
La Citometría de Flujo es un método rápido, cuantitativo y multiparamétrico que permite la caracterización y el análisis simultáneo de diferentes poblaciones celulares.
Resulta de extrema utilidad para el screening, diagnóstico y seguimiento de la HPN.
Es el método de elección respecto a otras técnicas convencionales por su precisión, rapidez y mayor sensibilidad, con capacidad de detección de clones de hasta 0.01%
¿Cómo se realiza el diagnóstico?
El diagnóstico se realiza mediante la demostración de una deficiencia parcial o total de 2 o más proteínas GPI dependientes.
Actualmente, en nuestro laboratorio realizamos el diagnóstico mediante la combinación de CD157 y FLAER, de acuerdo con las recomendaciones de guías internacionales.
La inclusión de estos anticuerpos ha mejorado significativamente la sensibilidad de la técnica, permitiendo identificar pequeños clones respecto a ensayos basados únicamente en CD157.
Una evaluación de alta sensibilidad
La combinación de CD157 y FLAER incorpora mayor robustez al ensayo.
En alguna muestra se identificó pérdida de CD157. Si bien la causa biológica permanece en estudio, la inclusión obligatoria de FLAER forma parte de la robustez incorporada del ensayo y evita la mala interpretación.
Características de la prueba
Información que necesitas conocer antes del estudio
Condiciones de la muestra
- Muestra: Sangre periférica, médula ósea, PAAF (aspiración por aguja fina) y otros líquidos corporales.
- Anticoagulante: EDTA K3.
- Volumen: 2ml a 3ml
- Análisis: dentro de las 24 hora (post-toma de muestra)
- Transporte: Temperatura ambiente.
Condiciones del instrumento
- Voltajes apropiados.
- Compensación óptima.
- Elección del panel de reactivos (titular los anticuerpos).
- Marcadores específicos para gates.
Diagnóstico por Citometría de Flujo
- Alta precisión y sensibilidad, clones de hasta 0.01%
- Criterio: Ausencia de al menos 2 antígenos GPI dependientes
- Poblaciones a estudiar: Neutrófilos-Monocitos
- Neutrófilos. Ausencia de: FLAER, CD157 y CD16. Detecta: Clon tipo II
- (deficiencia parcial) Clon tipo III (deficiencia total)
- Monocitos. Ausencia de: FLAER, CD157 y CD14.
Recomendaciones: Es recomendable el uso de anticuerpos como FLAER y CD157, porque permiten alcanzar una alta sensibilidad y especificidad. Además, identifica casos de pequeños clones.
Utilidad de la prueba
La HPN es una enfermedad poco frecuente pero que impacta seriamente en la calidad y esperanza de vida de los pacientes, razones más que suficientes para aplicar metodologías que permitan un diagnóstico certero ante la sospecha de enfermedad. La HPN es una enfermedad sistémica que puede involucrar a varios órganos, como hígado, riñón, pulmón, sistema nervioso central y/o corazón, y se caracteriza principalmente por hemólisis intravascular, trombosis y falla medular.
